实验室检查诊断甲鱼常见病害

 
    检查的目的是具体了解疾病的病症，查明病原，为确诊打下基础。检查分鳖体检查、剖检和实验室检查。以下介绍实验室检查。实验室检查的工作主要包括镜检、病毒分离、细菌培养、生化试验、电镜观察等。

    1．镜检：在整个实验室检查中随时会用到镜检，但第一步镜检的目的是为了检查有无寄生虫存在。用玻片压展法制片，部位是体表和内脏器官的黏液、病灶、血液，然后在显微镜下观察。

    2．病毒分离：病毒检查的方法很多，这里介绍一种比较简单取病鳖的脑、肝、脾、肾、胆等内脏器官用灭菌生理盐水洗2～3次后，剪碎，匀浆机匀浆，加入含200单位（微克）/毫升青霉素、链霉素的双抗HanK's液，制成10％～20％的组织悬液，再以2000转/分钟离心10～20分钟，吸取上清液分别接种于已长成单层的FHM、EPC或其它传代细胞，置培养箱中37℃下培养。7天后将接毒的培养细胞冻融1次，吸取该细胞冻融液1毫升盲传于另一瓶正常传代细胞中，为盲传一代，依此盲传3～4代后，将病毒的细胞培养物在铜网上吸附，用2％磷钨酸负染，电镜下观察病毒颗粒。与此同时进行病毒核酸类型的鉴定、耐酸性试验和乙醚抵抗性试验等理化特性检验，对病毒进行综合鉴定。

    如果你仅仅想知道疾病是否由病毒引起，而无需了解是哪一种病毒时，有一种方法更简单方便：取病鳖的肝、肾、脾等组织，用灭菌生理盐水冲洗2～3次后，剪碎研磨成组织悬液，加入青霉素、链霉素各1000国际单位/毫升，作用一段时间后，离心取上清液，按每只0.2毫升的量注射于健康小甲鱼，饲养一段时间后，观察有无病症出现，可确定该疾病是否由病毒引起。

    3．细菌分离：无菌操作取病鳖体表病灶和内部器官的病变组织，用接种环反复插入后，划线接种于营养琼脂平皿，放入30℃恒温箱中培养24小时后，观察各菌落形态，并挑取各菌落涂片，经革兰氏染色后显微镜下观察细菌形态。同时，挑取各菌落分别划线于营养琼脂平皿、新鲜鸡血琼脂平皿，置于30℃下进行纯化，培养24小时后，再涂片，进行革兰氏染色和鞭毛染色，显微镜下观察细菌形态结构。有条件的地方，可取细菌培养物铜网上制膜，2％磷钨酸（pH值7.0）负染后，电镜下观察细菌的细微结构。

    然后，将各菌株进行各种生理生化试验，确定其生长适温、各种理化特性。

    最后，根据其细菌菌落颜色、大小、有无溶血现象以及菌株的形态、大小、生长适温和各种理化特性，参考《一般细菌常用鉴定方法》、《伯杰氏细菌鉴定手册》、《动物微生物学》、《水产动物疾病学》等书籍资料，确定病原菌的名称。有条件的地方，最好加一步动物感染试验和鳖的感染试验，确定几种菌株中，哪一种或几种是主要致病菌。

    在此基础上，可分别对几种菌作药敏试验，确定治疗药物。